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兔補體蛋白3(C3)ELISA試劑盒

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產品特點:
產品名稱:兔補體蛋白3(C3)ELISA試劑盒
產品規格:96T/48T
供應品牌:RD TSZ
保存條件:2-8℃
運輸條件:低溫運輸,用干冰或者冰袋低溫運輸。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等。
  兔補體蛋白3(C3)ELISA試劑盒的詳細資料:

兔補體蛋白3(C3)ELISA試劑盒標本要求

1. 血清::溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

2. 血漿:根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

3. 尿液:無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。

5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑,用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

兔補體蛋白3(C3)ELISA試劑盒使用方法

測定法的靈敏度來自作為報告的酶。眾所周知,酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導大量的催化反應,產生可供觀察的顯色反應現象。因此該體系常被稱為酶放大體系。

1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

   24μg/ml    5號標準品    150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

   12μg/ml    4號標準品    150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

   6μg/ml     3號標準品    150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

   3μg/ml     2號標準品    150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

   1.5μg/ml   1號標準品    150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

2. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   

4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

操作步驟
用于檢測未知抗體的間接法:
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
   ↓   
加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
   ↓   
于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml,   37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
   ↓
加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
     ↓
終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
     ↓
結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+"、“-"號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

本公司提供各種種屬各種系列ELISA檢測試劑盒,主要用于科研方面,不用于臨床診斷。可以用于檢測各種指標。
主要分為以下系列:
1.細胞因子檢測試劑盒
2.內分泌檢測試劑盒
3.肝纖維化檢測試劑盒
4.心肌梗塞檢測試劑盒
5.腫瘤標志物檢測試劑盒
6.自身免疫檢測試劑盒
7.優生優育檢測試劑盒
8.傳染病檢測試劑盒等等。 
ELISA試劑盒本司提供實驗代測服務,詳情請登入我司查詢

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主營:ELISA檢測試劑盒;免疫組化試劑盒,胎牛血清;酶聯免疫試劑盒,進口抗體,生物試劑 公司地址:上海市閔行區莘莊工業園區金都路3688號E幢101-106室 郵政編碼:201100 
聯系人:錢勇強 聯系電話:13636351217傳真號碼:86-021-64881400 
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